琼脂糖凝胶电泳是用琼脂糖凝胶作支持物的电泳法，借助琼脂糖凝胶的分子筛作用，核酸片段因其分子量或分子形状不同，电泳移动速度有差异而分离。是基因操作中常用的重要方法。本实验室所用的仪器是Bio-Rad Power PacTM Basic电泳仪。

　　操作流程

　　1、凝胶准备：将称好的琼脂糖置三角瓶中，加入电泳缓冲液，微波炉加热熔化琼脂糖，熔化的琼脂糖自然冷却到60～70℃时，加入EB并轻轻混匀。

　　2、胶床准备：取出胶床和梳子，将梳子垂直插入到胶床的小凹槽内，梳齿底端和床面有1mm的间隙，将胶床放在调整好的水平台上。

　　3、铺胶：将冷却致60℃的凝胶倒入准备好的胶床内，凝胶厚度3～5mm，室温下静置30分钟左右，凝胶固化。将凝胶的胶床置于电泳槽中，并使样品孔位于电场负极。

　　4、电泳准备：向电泳槽中加入电泳缓冲液，越过凝胶表面即可，轻轻拔出固定在凝胶中的梳子。

　　5、样品准备：向核酸样品中加入上样缓冲液，用加样器轻轻混匀

　　6、上样：用加样器吸取样品，轻轻的加入到凝胶的样品孔中。

　　7、电泳：盖上电泳槽，打开位于仪器右侧的电源开关，设置电泳参数按《V》键后可以“↑”键或“↓”键调节电压值，按《A》键后可以“↑”键或“↓”键调节电流值。在待机/预置状态下按“RUN/STOP”键，进入运行状态，电泳仪输出高压。

　　8、电泳结束后，按“RUN/STOP”键，返回待机/预置状态，取出凝胶。

　　9、电泳结果分析：在紫外检测仪直接观察电源条带并摄影记录

　　10、测定工作全部结束后，检查电极是否干燥;用软布清洁仪器表面。

　　注意事项

　　1、凝胶浓度选择根据样品DNA分子大小而定，所以电泳前应对DNA片段大小有粗略的估计;

　　2、用胶布封闭胶床两端时，要确保严密，以免灌胶时有胶液漏出;

　　3、用微波炉熔化琼脂糖时，以免突然产生气泡，使琼脂糖溢出来;

　　4、凝胶冷却至60℃左右，立即铺胶，以防凝固;

　　5、上样前检查样品孔内是否有气泡，并设法排除;

　　6、电泳前，确认样品孔位于电场负极;

　　7、因EB存在，全部操作过程要带防护手套。