2022年2月，北京大学第一医院血液内科李渊主任医师研究团队发现，在异基因造血干细胞移植后预防性应用阿扎胞苷（5-Aza）联合DZNep，可能通过趋化因子—细胞因子通路改善移植物抗宿主病。

　　研究成果《Low-Dose 5-Aza and DZnep Alleviate Acute Graft-Versus-Host Disease With Less Side Effects Through Altering T-Cell Differentiation》以论著形式发表于国际知名免疫学期刊Frontiers in Immunology杂志（Q1区，IF 8.79），李渊主任医师和任汉云教授为共同通讯作者，王清雅主治医师和刘绘绘助理研究员为共同第一作者。

　　移植物抗宿主病（GvHD）是异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）的主要并发症之一，影响移植的预后。现有的GvHD预防及治疗方案，仍未达到理想的效果，还有导致疾病复发、感染发生的风险。因此，探索有效的GvHD预防及治疗方案，实现在缓解GvHD的同时保留移植物抗白血病效应（GvL）以减少复发，成为allo-HSCT相关研究的热点之一。

　　表观遗传学是指在基因组核苷酸序列不发生变化的条件下，基因表达发生的可遗传的变化。目前研究发现，表观遗传学调节剂具有免疫调节作用，因而可能成为GvHD治疗的有效手段之一。但是单独应用一种表观遗传学调节剂无法完全控制GvHD且存在血细胞减少等毒副作用，导致感染、出血风险加重。5-Aza和DZNep代表了两种作用机制不同的表观遗传学调节剂，即DNA甲基转移酶抑制剂及组蛋白甲基化抑制剂。研究发现，两种作用机制不同的表观遗传学调节剂具有协同作用。因此，北大医院血液内科研究人员设计了实验，选用5-Aza联合DZNep，验证两种调节剂联合应用在防治GvHD中的效果。

　　研究人员首先优化了单个和组合5-Aza和DZNep的浓度，通过评估T细胞增殖、活力和分化，确定用药最佳剂量后证明对活化的T细胞没有明显的毒性。然后建立aGvHD小鼠模型，分别应用5-Aza、DZNep及其组合，评估用药对T细胞的免疫调节作用和造血重建的影响，观察对aGvHD的预防疗效。最后通过RNA测序（RNA-seq）确定潜在的分子机制。

图1 在体外应用5-Aza联合DZNep，相比于单独用药组，其减少Th1/Tc1、增加Th2/Tc2、增加Treg的作用增强

图2 在aGvHD小鼠模型中应用5-Aza联合DZNep相比于单独用药组，其缓解GvHD、改善生存的作用增强

图3 在aGvHD小鼠模型中应用5-Aza联合DZNep，相比于单独用药组，其减少Th1/Tc1、增加Th2/Tc2、增加Treg的作用增强

图4 RNA测序分析提示联合用药组相比于对照组，其细胞因子、趋化因子通路上的基因存在显著表达差异

　　研究结果显示，由于联合用药组每种药物的应用剂量仅为单独用药有效剂量的1/10至1/2，其导致血细胞减少的毒副作用明显减轻。相比于单独用药组，DZNep联合5-Aza体外应用可以更有效地减少Th1/Tc1的产生并增加Treg的产生（图1）。在aGvHD小鼠模型中，体内给予5-Aza联合DZNep，相比于单独用药组可以增强对aGVHD的预防作用（图2）。相比于单独用药，联合用药能够更有效地抑制Th1/Tc1产生、增加Th2/Tc2比例、诱导Treg分化的作用（图3）。RNA-seq分析表明，细胞因子和趋化因子通路是5-Aza和DZNep组合缓解aGvHD的一种机制（图4）。

　　本研究提示，在allo-HSCT后早期联合应用去甲基化药物5-Aza和组蛋白修饰调节剂DZNep可降低aGvHD的发生率，改善总生存率，且因药物用量小，副作用明显减轻。其潜在的机制可能与其免疫调节作用有关。

　　本研究为allo-HSCT后5-Aza和DZnep联合治疗aGvHD提供了理论基础，作为预防aGvHD的新方法，为未来的临床研究提供了新思路。研究得到国家自然科学基金面上项目、北京市自然科学基金面上项目、北京大学临床医学+X青年专项等多项基金的资助。

　　通讯作者：

李渊，主任医师，副教授，博士生导师

　　研究方向为血液肿瘤的表观遗传学调控、造血干细胞移植、干细胞生物及治疗。作为项目负责人主持国家自然科学基金面上项目等10余项基金。以第一作者及通讯作者发表SCI及核心期刊论著20余篇，单篇影响因子超过7.0分的Q1区SCI论著7篇。现担任北京大学医学部血液病学系副主任、中华医学会血液学分会造血干细胞应用学组委员、北京医学会内科学分会青年委员、中国抗癌协会血液肿瘤专业委员会MDS/MPN组委员、中国女医师协会临床肿瘤专业委员会委员、国家自然科学基金生命科学部、医学科学部项目评审专家。

任汉云，主任医师，教授，博士生导师

　　北京大学第一医院血液肿瘤中心主任，现为国家血液系统疾病临床医学研究中心、北京大学血液病学重点学科的主要学术带头人。中华医学会血液学分会第7-10届常委，中华骨髓库专家委员会副主任委员，中国老年协会肿瘤专业委员会副主任委员，中国医药教育协会血液学专业委员会副主任委员，中国淋巴瘤联盟常委，中国白血病联盟常委，中国实验血液学会委员，中国医师协会血液学专业委员会委员。2005年获中国医师协会中国医师奖。

　　第一作者：

王清雅，医学博士，主治医师

　　共同第一作者：

刘绘绘，医学博士，助理研究员

　　（血液内科  王清雅）