一 进入：

　　1、将独立门卡贴近门禁面板开大门。

　　2、将带入物品放入传递窗，开消毒灯10分钟。

　　3、换拖鞋、戴一次性帽子、手套、穿隔离衣。

　　4、关好大门，开第二道门。

　　5、关好第二道门，开消毒间门。

　　6、关消毒灯，将传递窗(1)中物品移至传递窗(2)，开消毒灯。

　　7、关好消毒间门，开第三道门。

　　二 离开：

　　1、将废弃物品转移至传递窗(2)，开消毒灯。

　　2、洗手、摘手套。

　　3、开第三道门。

　　4、关好第三道门，开消毒间门。

　　5、关消毒灯，将传递窗物品取出消毒。

　　6、摘掉脏手套，洗手，戴新手套。

　　7、将消毒好物品包装后，放入传递窗(1)，开消毒灯。

　　8、开消毒间门后，并关好门。

　　9、开第一道门。

　　10、关消毒灯，取出传递窗(1)中物品。

　　11、脱隔离衣、手套、帽子、换拖鞋，将手套帽子投入污物桶内。

　　12、开大门，带包装好的废弃物品离开。

　　细胞培养室安全和操作守则

　　位置：科研楼地下室东区

　　细胞培养室不同于其他实验室，要求在无菌条件下进行实验。所以每位做细胞培养的同人都要严格无菌操作，保持无微生物污染，以便实验顺利进行。

　　一、 准备室

　　1、 严格遵守培养器皿的洗刷、浸酸和消毒制度。

　　2、 准备室分污染区和清洁区，污染区：是待清洗的器皿。清洁区：是器皿浸酸经水冲洗干净后，待消毒的器皿。

　　3、 塑料制品勿用高压锅或烤箱消毒，可包装好后用钴60照射消毒。

　　4、 培养瓶盖、橡胶塞子和细胞过滤器，要求分装包裹后用高压锅消毒0.15mpa 20分钟。

　　5、 玻璃器皿可用烤箱消毒(160℃ 2.5-3小时)

　　6、 使用高压锅消毒要按规定操作，有专人看管，以保证安全。

　　二、 观察和操作室

　　1、 进入操作室必须戴好口罩、帽子和鞋套(或换好拖鞋)方可入内。

　　2、 实验前洁净台要紫外线消毒30-40分钟，并登记在登记本上。

　　3、 正确使用细胞室的各种仪器

　　a、 显微镜： 按显微镜使用须知操作。

　　b、 离心机：使用前要将待离物品平衡好后再离心，拨动旋钮要慢。

　　c、 二氧化碳培养箱：(1)开关门要快，不可将门长时间敞开着。

　　(2)培养液如果洒在培养箱内要及时清洁(用75%酒精或0。1%新洁尔灭)以防细菌污染。

　　(3)培养箱内水盘每周换一次，由值周人员负责。

　　4、细胞在培养过程中，如果发现瓶内液体浑浊，请不要打开瓶盖，及时处理，以防污染。

　　5、实验结束后用75%酒精清洁台面，将实验物品摆放整齐，及时清洗用过的器皿。

　　6、如果发现问题及时找工作人员联系

　　免疫组化实验室简介

　　位置：科研楼二层和五层东北角

　　免疫组化实验室现拥有先进的常规病理技术大型设备，包括：恒冷箱切片机、自动脱水机、石蜡切片机、包埋中心、图象分析系统。可开展经典病理学制片，特殊染色，免疫组织化学，原位杂交和其他分子病理技术。

　　免疫组化室使用注意事项及流程

　　安全守则

　　1. 做实验必须经过中心实验室的同意，必须遵守中心实验室的一切规定。

　　2. 小心使用仪器，恒温箱及水浴锅高温不可无人看管或过夜使用，使用后进行登记。

　　3. 不能使用明火，以免引燃有机试剂。使用有毒害可挥发液体操作需在通风厨内进行。

　　4. 如果晚上做实验需要提前说明。

　　5. 最后离开时，必须关上机器、关上电源。

　　6. 保管好个人物品，一切自带物品丢失责任自负。

　　标本处理注意事项：

　　新鲜组织应及时固定，一般推荐使用10%福尔马林固定6-24小时。切成不超过1.5╳1.5╳0.5cm3大小的组织块。根据特殊检查(特殊染色和组织化学染色、免疫组织化学染色和原位杂交)的需要，选择其它适宜的固定液进行固定。如果需要进行脱水、浸蜡程序请与负责老师联系。

　　包埋中心使用注意事项：

　　1. 需与负责老师预约好使用时间，并提前准备好组织块。

　　2. 实验耗材由实验室提供。

　　3. 使用结束后需清理干净石蜡残渣。

　　石蜡切片机使用注意事项：

　　1.使用前请提前预约。

　　2.自己准备中楷毛笔及干净镊子和载波片。

　　3. 使用结束后应清理干净所有残渣，锁好刀头。

　　冰冻切片机使用注意事项：

　　1. 使用冰冻切片机者应购买一次性刀片及借用金属圆托。

　　2. 自己准备好冻存的标本、OCT和涂有防脱片剂的载玻片。

　　3. 使用结束后应清理干净所有残渣，刀位调至中位处并锁好刀头，机器在一般情况下维持机箱温度在–10℃左右，不必关机。

　　图象分析系统使用注意事项：

　　1. 必须经过负责老师的同意方能使用显微镜，不能擅自使用。

　　2. 显微镜关机后如需使用必须间隔30分钟以上。

　　3. 因显微镜灯泡属消耗品，希望使用时节约时间，以增加灯泡寿命。

　　4. 不能使用移动硬盘和U盘，以免将病毒带入。采图后和负责老师联系刻录光盘。光盘5元/每张。

　　5. 望大家爱护仪器，小心使用。

　　免疫组化实验安全操作流程：

　　1. 冰冻切片保存于–70℃，用冰甲醇及丙酮各固定5分钟。石蜡切片用专用透明剂脱蜡，用乙醇及PBS洗后加入修复液，在微波炉或高压锅中修复抗原。

　　2. PBS洗片后用封闭液封闭一小时，用生物素标记的二抗者需先用H2O2阻断内源性过氧化物酶。

　　3. PBS洗标本后加入一抗在室温下作用一小时。

　　4. 用清洗液洗三次，每次5分钟。

　　5. 加入二抗，室温下作用一小时。

　　6. 在清洗液中洗三次，每次5分钟。

　　7. 若二抗为荧光抗体应在暗盒中操作及保存，然后用荧光显微镜照相。

　　8.若二抗为生物素标记，应该用链亲和素结合的辣根过氧化酶再作用一小时，然后清洗3次，每次5分钟，然后用DAB显色。若二抗为碱磷酶标记，则用NBT/BCIP显色。

　　9.显色后用苏木精复染，封片。

　　BD InfluxTM流式细胞分选仪

　　位置：科研楼四层XXX房间

　　BD InfluxTM流式细胞分选仪是BD在流式领域的最新力作，在细胞治疗、移植、干细胞研究，少量细胞分选方面具有独特的优势。

　　本研究所配备的BD Influx具有355nm、 488nm、633nm三根激光，可同时检测多达10种以上的荧光颜色。

　　新的分选模式，比如比例分选模式和位置分选模式，将分选能力拓展到了基因组学和蛋白质组学研究。主要用于细胞分选，同时可做细胞膜表面标记、细胞凋亡、细胞周期分析、DNA 分析(如DNA 倍体)、细胞内标记、细胞表面蛋白和细胞内蛋白的表达分析、造血干细胞的检测、细胞生理学研究和液相蛋白定量分析等等。

　　样品准备：

　　依不同的应用目的，样品准备具有不同的方法，可提前联系泌尿所老师，获取不同的准备方法。最后一步要求必须上机前微孔膜过滤。具体见附件样品准备Protocal.

　　上机：

　　必须在泌尿所老师的指导下进行。

　　关机：

　　关机前必须做好清洗工作，按如下步骤进行，

　　1.关激光

　　2.清洗系统：上样管中加10%的漂白水3ml上样5分钟，加蒸馏水3ml上样5分钟，按Run关闭液流，关气源开关，清空鞘液桶，用蒸馏水冲洗后装1L蒸馏水，盖好鞘液桶盖子并重新打开气源开关，按Rinse，然后按 Backflush 冲洗所有管路直到鞘液桶没水，直到样本管路不再滴水，按Rinse关掉液流。

　　3.干燥液路 取下Nozzle，将Flush bucket放在Nozzle支架下方，打开压力阀降下鞘液桶压力，短接鞘液滤器，从鞘液桶拔下气路和液路管路并将他们连在一起，按Rinse，然后按Backflush，让空气在系统里流动10-15分钟以使管路干燥，关气源开关，倒空废液和鞘液桶并用蒸馏水冲洗干净后干燥过夜，一定记住卸鞘液桶压力，否则可能会导致液体泄露。

　　4.清洁分选仓 关偏转板电压，打开后用湿纸巾擦干净偏转板，清洁分选仓、Nozzle附近腔、上样台。

　　5.关闭系统 关掉附属开关或关主电源开关，关所有激光，关真空和气源开关。

　　收费标准：

　　细胞分选，300 元/小时。细胞检测，100元/小时。

　　附：

　　1. 流式分选样品准备

　　2. 细胞表面标记检测样品准备

　　3. 细胞内炎症因子或蛋白的检测样品准备

　　4. 凋亡检测样品准备

　　5. 细胞周期检测样品准备

　　BD分选式流式细胞仪

　　位置：科研楼一层东侧开放仪器区

　　流式细胞术(flow cytometry,FCM)是利用流式细胞仪对生物颗粒包括细胞、血小板、微生物以及人工合成的微球等进行多种物理和生物学特性定量分析，并能对特定的细胞群加以分选的一种细胞参量分析技术。BD FACSAria流式细胞分选仪为流式细胞仪高速分选和多色分析技术设定了更新更高的标准。仪器的设计采用全新理念，极大地简化了高速分选和多色分析的操作和实验要求。本仪器为中心实验室百万元级高级仪器，由专人负责使用、调试和维护。

　　一、激光器配置

　　Laser1:488nm Coherent Sapphire solid state 13mW-20mW

　　laser2:633 nm JDS Uniphase HeNe air-cooled 10mW-20mW

　　Laser3:407 nm Point Source Violet solid state(for Hoechst znd DAPI010MW-17mW .

　　二、主要应用

　　流式细胞仪对细胞悬液进行快速分析，通过对流动液体中排列成单列的细胞进行逐个检测，得到该细胞的光散射和荧光指标，分析出其体积、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等物理及化学特征。 本室购进的BD FACSAria流式细胞分选仪使用石英杯流动检测池固定光路校准技术。仪器内置的BD AccuDrop系统可以快速准确地确定液滴延迟时间。主要用于微生物分析，细胞分选，细胞凋亡、DNA 分析(如DNA 倍体)、细胞周期分析，细胞内标记，造血干细胞的检测、细胞膜表面标记、细胞生理学研究和液相蛋白定量分析等等。

　　三、目前使用范围

　　1. 细胞的免疫检测(测定T细胞、B细胞、NK细胞等细胞亚群的 含量)

　　2. 细胞周期分析

　　3. 细胞分选

　　4. 细胞凋亡分析

　　四、操作方法

　　(一)样品准备

　　(二)开机程序

　　1.安装合适的喷嘴(70um或100um)喷嘴至少要达到分选颗粒直 径的三倍大小。

　　2.开启仪器电源，并确保激光器处于关闭状态。

　　3.打开流动检测池上盖。

　　4.启动激光器，等待20分钟使它预热，10分钟时可继续步骤5。

　　5.打开电脑，在登陆页面输入用户名和密码，观察桌面右下角的 网络连接图标是否显示仪器。

　　6.检查仪器窗口底部的液流系统水平：如果需要，则充满液体或 倾空液体。

　　7.在FACSDiva软件的“Instrument(仪器)”菜单中，选择“Fluidics Startup'选项：并在提示下单击OK键。

　　8.当“启动液流系统”程序完成后，使用控制软件来开启液流。

　　9.打开分选区门，检查位于废液吸引器中的液流的位置，并检查 液流断点窗口中的液流情况。

　　10.关闭分选仓门和流动检测池上盖。

　　11.如果需要，在“Sort菜单中选择”High Sort Setup(高速分选设置)“选择设置鞘液压力。

　　(三)关机程序

　　1.打开流动检测池上盖。

　　2.关闭液流。

　　3.选择“Instument>Fluidics Shutdown(关闭液流系统)”选项

　　4.出现以下提示信息时，在进样管中装入越1ml洗液，放于载物 台上，单击OK。

　　5.在进样管中加约1ml去离子水，放于载物台上，然后单击OK。

　　6.看到“系统已关闭”信息时，单击OK。

　　7.退出BD FACSDiva软件，关闭计算机。

　　8.关闭激光器电源，关闭仪器主电源，关闭稳压电源。

　　Olmpus激光共聚焦显微镜FV1000使用注意事项及要求

　　位置：科研楼一层东侧开放仪器区

　　激光共聚焦显微镜是对光学显微镜的重大改进，主要表现为可以观察活细胞、固定细胞和组织的深层结构，在活细胞影像上实现了高灵敏度、高速和高精度观察的共聚焦系统。并且可以得到清晰锐利的多层Z平面结构，即光学切片，并以此可以构建标本的三维结构。本仪器为中心实验室百万元级高级仪器，由专人负责使用、调试和维护。

　　一. 样品准备：

　　请将玻片放在4℃避光保存。

　　需要观察活细胞动态变化的必须使用共聚焦特制小皿。

　　二. 提前预约：

　　电话：83572656

　　三. 请根据需要选择存储图形文件格式

　　四. 只能使用光盘拷贝文件

　　Leica激光显微切割仪(LMD6000)使用注意事项及要求

　　位置：科研楼一层东侧开放仪器区

　　本显微切割仪为德国莱卡公司生产，采用正置全自动显微镜平台，紫外激光棱镜扫描式切割分离样品;利用重力下坠收集样品。 波长 355nm。 本仪器为中心实验室百万元级高级仪器，由专人负责使用、调试和维护。有需要使用仪器者请遵守下列规则：

　　1. 使用者请提前预约。

　　2. 请认真查阅有关实验的条件、方法、要求。

　　3. 自行解决实验所需试剂、耗材(0.2、0.5离心管，特殊玻片---可与莱卡公司联系)。

　　4. 需要一定冷冻切片技术，自行解决所需样品的制备。

　　5. 仪器使用中服从老师的指导，出现问题及时报告，未经允许不得随意调试。

　　认真填写仪器使用记录

　　小动物活体显像Xenogen IVIS Spectrum系统

　　位置：科研楼四层XXX房间

　　简介：

　　Xenogen IVIS Spectrum系统是300万元以上的昂贵仪器，其主要应用范围如下：

　　1. 基因治疗在活体动物体内直接的观察和检测;

　　2. 标记细胞或基因的示踪及检测;

　　3. 对药物研究显示高质量的数据结果;

　　4. 基因组、蛋白组学、药学及生物技术在活体动物内的研究;

　　5. 药物及化学合成药物的药物代谢及毒理学监测。

　　操作前要求：

　　1. 必须提前预约，泌尿所老师可代做，但需收取一定费用。

　　2. 可进行培训，合格或熟练后取得自行操作资格，仅收取仪器消磨费。

　　3. 收费：

　　开机：

　　启动计算机，开启主机电源(在imaging chamber后方);计算机开启后，点选桌面上Living Image图标，启动程序;启动程序后，系统会要求点选个人ID进入。若为新使用者，请键入三个字的英文字母作为ID名称;画面出现control panel，按下“initialize IVIS system”，启动整套IVIS系统;待机器完成启始动作后，control panel 中的温度状态灯号为红色，等候约5-10分钟后温度降低，灯号转绿就可进行影像获取工作，此外按下温度灯号也可以观测目前CCD的温度及设定载台温度。

　　关机：

　　关闭软件：请点选主画面中“Living image”中的“Exit”;关掉计算机及主机电源：待软件关闭后，则照一般计算机关机关机程序关闭计算机，及关闭主机电源。

　　蛋白液相分析FLEXMAP 3D系统

　　位置：科研楼四层XXX房间

　　简介：

　　FLEXMAP 3D系统是新一代的灵活且简便易用的高通量多重分析及检测平台，可实现了对同一样本500个指标的平行检测。目前在液相芯片平台使用的所有微珠产品均可在FLEXMAP 3D系统使用。

　　应用范围：

　　1. 免疫分析，与ELISA类似，需订购专门的试剂盒。

　　2. 激素水平测定

　　3. 核酸检测：检测细菌，病毒核酸;基因多态性检测;核酸定性定量。

　　样品上机前准备：

　　1. 请联系泌尿所老师，进行培训，合格后可自行操作。

　　2. 爱护仪器，损坏赔偿。

　　开机：

　　在Home主页面, 点击左边System Initialization图标，软件会自动打开Maintenance页面下的Auto Maint页面。 在Admin页面下的System Setup下有三个选项列表(下面以a, b, c表示)，它们都可以用于系统开机操作。其中每周需要进行校准(calibration)操作，每日则需要进行校验(performance verification)操作以保证系统性能正常。

　　关机：

　　每天系统运行完毕后都要执行一次常规的系统关机操作。关机操作主要对管路系统进行消毒处理，去除多余的缓冲溶液，同时也能防止样品探针中的孔道形成阻塞。 在Home主页面中，点击右侧的第二个Shutdown图标。 向微孔板布局图指定的相应的贮液槽中加入20%的消毒剂，点击Run。

　　ABI 7300型定量PCR仪

　　位置：科研楼一层东侧开放仪器区

　　7300型实时荧光定量PCR将PCR热循环、荧光检测和各种应用分析软件结合在一起，可以动态观察PCR每一循环各反应管中PCR扩增产物逐渐增加的情况。PCR实验结束后可以马上得到定量结果。本仪器采用96孔反应板或单管及8联管，反应体积25 --100 µl，实验可以在不到2小时内结束。请使用本仪器者遵守下列规定：

　　1. 提前预约(不得超过3天)---登在仪器记录本上。如果情况有变化请及时取消预约。

　　2. 本仪器使用的试剂、耗材、样品请自行解决。

　　3. 初次使用本仪器者请在老师指导下操作。

　　4. 每次实验完成请及时取出实验样品、关机并进行使用登记。

　　5. 实验完成后清理存储文件，以为他人提供足够的使用空间。

　　6. 实验中如有异常请及时报告。

　　AB 3130XL测序仪使用注意事项

　　位置：科研楼五层分子诊断

　　此款测序仪特点: 采用16道毛细管，24 小时无人监控操作，仪器设置更方便更简单，新型自动灌胶系统进行灌胶，检测池加热器改进了温度控制，通过 96 孔和 384 孔板自动进样，多色荧光检测，一种分离胶一种毛细管用于多种应用。本仪器为中心实验室百万元级高级仪器，由专人负责使用、调试和维护。

　　使用者进入实验室之前应做如下事项：

　　1.使用者在使用之前，一定事先和中心实验室该仪器的负责人联系，得到允许后才能进入实验室进行实验。

　　2.实验时一定确保实验区和操作区分开，以防止污染。

　　3.所有与测序有关的实验，操作中都要使用无粉手套。

　　4.测序仪中设定好的参数，实验者不能随意改动。

　　5.实验者在做实验之前务必将实验所用到试剂盒中的说明书上所要求的运行模式条件告知负责人。

　　6.实验者将自己的数据存在负责人规定的位置，限期内必须以刻盘的方式拷贝走，不能随意乱插移动硬盘。

　　7.实验者在实验时，一定确保上机用的胶和Buffer的量充足，有问题及时找负责人，不能私自处理。

　　8.实验完毕后在登记本上做好登记，告知负责人实验结束，使用者实验过程中务必确保实验室的干净整洁。

　　9.开机和关机一定要严格按照规定顺序执行。

　　显微镜使用须知离心机的使用、维护和校准

　　位置：科研楼二五层病理室和地下室细胞培养1~4室

　　1. 揭开显微镜防尘罩时动作要轻，切勿将接目镜碰掉。

　　2. 检查电源是否在关的位置，以及光强调节钮是否在“O”。

　　3. 插上电源，将主开关拨到“I”(开)。

　　4. 顺时针转动光强调节钮，使照明更亮，顺时针转动则照明变暗。

　　5. 将样品放到固定器上，如是载玻片放在载玻片固定器上，转动旋钮移动物品。

　　6. 选用物镜或改变物镜要小心。注意使用中物镜与样品的距离，防止摩擦碰撞。

　　7. 注意不要将任何液体溅到显微镜上，如果溅到显微镜上，应立即将主机拨到“O”，拔下电源线，将液体擦干净。

　　8. 切勿用布或粗糙物品擦拭物镜或目镜，以免损坏镜头。

　　9. 不使用显微镜时，待灯座冷却，请用防尘罩盖上显微镜。

　　10. 用毕后请登记。

　　荧光显微镜使用注意事项

　　位置：科研楼一层西区“荧光显微镜和图像分析室”

　　6. 必须经过负责老师的同意方能使用显微镜，不能擅自使用。

　　7. 显微镜关机后如需使用必须间隔30分钟以上。

　　8. 因显微镜灯泡属消耗品，希望使用时节约时间，以增加灯泡寿命。

　　9. 不能使用移动硬盘和U盘，以免将病毒带入。

　　收费标准：透射光 30元/小时;荧光 50元/小时;最少使用时间为30分钟。光盘5元/每张。

　　离心机的使用、维护和校准的标准操作程序

　　位置：科研楼二、五层开放实验区

　　1.目的：保证离心机的正常使用。

　　2.适用范围：适用于本室使用的普通离心机和低温离心机。

　　3.操作人：张英 王松涛

　　4.操作

　　4.1 .使用方法

　　4.1.1.普通离心机

　　a)离心机应放置在水平坚固的地板或平台上，并力求使仪器处于水平位置以免离心时造成仪器振荡。

　　b)打开电源开关，将预先平衡好的样品对称放置于转头的样品架上，关闭机盖。

　　c)旋动定时旋钮设定离心时间，缓慢旋转转速调节旋钮使仪器转速达到预定要求。

　　d)离心完毕后，将转速调节旋钮调回零位，关闭电源开关。

　　e)待离心机完全停止转动时打开机盖，取出离心样品，再次关闭机盖结束离心。

　　4.1.2.低温离心机

　　a)离心机应放置在水平坚固的地板或平台上，并力求使仪器处于水平位置以免离心时造成仪器振荡。

　　b)打开电源开关，按功能选择键，设定离心温度、速度和时间。

　　c)待机腔温度达到设定要求时，将预先平衡好的样品对称放置于转头的样品架上，关闭机盖。

　　d)按启动键，离心机将执行上述参数进行运行，到预定时间自动关机。

　　e)待离心机完全停止转动时打开机盖，取出离心样品。如不再使用该离心机，关闭电源，用柔软干净的布擦拭转头和机腔内壁，待离心机腔内温度与室温平衡后方可盖上机盖。

　　4.2 .维护保养

　　a)离心室的清洁：为了避免样本等残留物的污染，应经常对离心机外壳和离心室进行清洁处理。对离心室清洁，应先打开离心机盖，拨掉电源线，用专用设备将离心机转头旋下，再用75%乙醇清洁离心室。

　　b)转头的清洁：转头会被样本残留物污染，也可能会被某些化学试剂腐蚀，因此应对转头每月进行清洁维护。

　　c)离心完毕后，应及时用干的软布拭去离心室的冷凝水。(此步仅适用于低温离心机)

　　d)离心结束后，使离心机盖打开，然后关机。

　　5.应急处理

　　如果离心时发现离心管破裂，必须先停止实验，将破裂管密封放入生物垃圾桶，再

　　用75%酒精进行擦拭消毒，如必要需用移动紫外灯照射30～60分钟后才能开始实验。

　　注意事项：

　　a)离心机应始终处于水平位置，与外接电源电压匹配，并要求有良好的接地线。

　　b)开机前应检查机腔有无异物掉入。

　　c)样品应预先平衡，使用离心机微量离心时离心套管与样品应同时平衡。

　　d)挥发性或腐蚀性液体离心时，应使用带盖的离心管，并确保液体不外漏以免侵蚀机腔或造成事故。

　　e)每次操作完毕，应做好使用情况记录，应定期对机器各项性能进行检修。

　　f)离心过程中若发现异常现象，应立即关闭电源，报请有关技术人员检修。

　　g)定期清洁机腔。

　　h)使用离心机时遵守左右手分开原则，只以右手操作仪器。

　　i)使用冷冻离心机时，除注意以上各项外，还应注意擦拭机腔的动作要轻柔，以免损坏机腔内温度敏感器。

　　j)相对离心力于每分钟转速的换算。

　　以往离心机的转速常以每分钟多少转表示，现在常用相对离心力(RCF)表示。

　　两者互换公式如下：

　　N=(RCF×105)/(1.18×R) RCF=0.011238095×R×N

　　N表示转速，单位为转/分(r/min);

　　R表示离心半径，即离心管底端至轴心的距离，单位为厘米(cm);

　　RCF表示相对离心力，单位用重力加速度g(g=9.8m/s)

　　低温高速离心机操作通用步骤

　　位置：科研楼地下室离心机室和各层开放实验区

　　1.平衡各离心管。

　　2.打开离心机电源开关。

　　3.轻轻抬起离心机盖,小心放入离心机转头。

　　4.对称放入己平衡好的离心管。玻璃离心管必须先放入塑料保护管内,然后再放入

　　转头内,以防离心管破损。

　　5.盖上离心机盖。

　　6.选择运行程序:

　　(1)选择转头的ID:按ROTOR按钮,当ROTOR ID闪烁时,旋转转盘选择转头ID码。

　　(2)设定转速:按SPEED/RCF 按钮,当SPEED/RCF闪烁时,旋转转盘选择所需的转

　　速。

　　(3)设定运行时间:按IME按钮,当TIME闪烁时,旋转转盘选择所需的时间。

　　(4)设定加速方式:用ACCEL按钮设定加速方式。

　　(5)设定减速方式:用DECEL按钮设定减速方式。

　　7.启动运行程序:按START 按钮(此时,离心机盖被锁定,转头开始运转,STOP灯熄

　　灭,START灯开始闪烁, 当达到设定速度时,START灯停止闪烁 )

　　8.结束运行:等待TIME指示器显示为"0",或直接按STOP按钮结束运行。

　　9.打开离心机盖取出转头和样本。

　　l0.关闭离心机电源开关,清洁离心机和转头。

　　注意事项：

　　1、离心前放入离心管的离心物品应用天平进行平衡。放入每个离心管的离心物不

　　可超过离心管所能容纳体积的三分之二。离心管放入离心转头前应盖紧离心管

　　的盖子并且要将一对对平衡好的离心管按对称位置放入离心转头中。

　　2、放下转头时，要确认转头是否正确卡入转轴中，防止转头凌空。因此使用前要

　　用手旋转一下转头，看其转的是否平稳。如不平稳，则转头未正确卡入转轴中

　　，要调整转头的卡入位置。

　　3、使用前要旋紧转头盖，旋紧时螺纹要相互吻合，不要旋歪。否则机器旋转时将

　　发生事故或损坏机器。旋紧转头盖后，盖好离心机盖，方可启动离心机。

　　4、离心机使用完毕后，应及时关掉离心机的电源开关，并拉下电源的闸刀开关。

　　同时将机内的水用布或纸擦干，并打开离心机盖将其晾干。转头，吊篮，套管

　　等，使用完毕后，应擦干，并分别放置;转头清洗后应倒置，使转头内的水全

　　部流出。

　　台式大容量冷冻离心机——Allegra X-15R

　　位置：科研楼一层东侧开放仪器区

　　性 能 ： Beckmann Allegra X-15R 大容量冷冻离心机最高转速为4750rpm，可设置0—4℃，有10ml、15ml和50ml圆底 (尖底可用) 离心管三种适配器。

　　使用范围 ：大容量多管的低速冷冻离心

　　操作规程 ：1.按机器左侧的POWER键.(填写仪器使用时间、人员姓

　　名、单位)

　　2.按SET键设置条件：转速/离心力、温度、时间、升速

　　(↗：1~10越大越快)降速(↘：0~10越大越快)，按

　　ENTER键输入。注意：不要更改转头号(ROTOR:4750)。

　　3.配平装有离心管的适配器，严禁向套筒中直接注水衡。应取两只空白离心管相对放置，加、减水配平。离心管在适配器中的位置原则见右图。

　　4.按DOOR键打开离心盖，对称放入离心管，按START进行离心。用毕，擦干离心筒，打开上盖，关闭电源，填写实验记录。

　　常见故障 ：设置错误

　　管理办法 ：1.使用者应提前预约

　　2.初次使用者需向主管人员申请，经培训后方可自己使用。

　　高速冷冻离心机 RC5C

　　位置：科研楼地下室离心机室

　　性 能 ：RC5C高速冷冻离心机配备两种转头SS—34(05),SH—MT(12),最高转速为20000rpm，可设置0 —4℃

　　使用范围 ：用于低温离心，要求离心转速5000—12000rpm，如有特殊要求应向主管人员申请。

　　操作规程 ：

　　1.打开电源开关(墙上)

　　2.按下离心机的POWER键，选择转头并安装转头

　　3.设置条件：转头号、温度、时间、转速

　　4.配平离心管，液面低于离心管的2/3。

　　5。将离心管对称放入转头(盖转头盖)，按 STAR进行离心

　　1. 用毕，卸下转头放回原处，擦干离心筒，打开机盖, 关闭电源.

　　7.填写实验记录

　　常见故障 ：1.所选择的转头与设置的转头号不匹配

　　2.使用SS—34转头时一定记住拧好转头盖

　　台式高速冷冻离心——28RS

　　位置：科研楼地下室离心机室

　　性 能 ： BIOFUGE 28RS 高速冷冻离心机最高转速为28000rpm，可设置0—4℃，1.5ml管头。

　　使用范围 ：小容量的高速离心

　　操作规程 ：1.按机器的POWER键

　　2.按SET键设置条件：转速、温度、时间、按ENTER键输入

　　3.配平离心管，每管溶液量少于一毫升，按LID键打开离心盖，对称放入离心管，按STER进行离心

　　4.用毕，擦干离心筒，关闭电源，填写实验记录

　　常见故障 ：设置错误

　　管理办法 ：1.使用者应提前预约

　　2.持证者可自己使用，其它需向主管人员申请，允许后方可使用

　　超速离心机技术资料

　　位置：科研楼地下室离心机室

　　性 能 ：最高转速70，000rpm,配备角式，水平，垂直三种转头，转头可设置温度0—40℃

　　使用范围 ：高转速离心(≥20000rpm )、密度剃度离心。

　　操作规程 ：

　　1.配平，离心管(本离心机专用)封口(盖)，装入转头

　　2.POWER打开

　　3.开盖，转头放入离心腔

　　4.关盖，设置离心条件：温度、转速、时间、升降速快慢

　　5.按VACUUM抽真空至VACUUM下的第二个绿灯闪烁

　　6.按CHECK，确认离心条件，再按START

　　7.到时停止或按STOP

　　8.转数为零时，按VACUUM

　　9.取出转头，POWER关闭

　　10.填写记录。

　　保 养 ：室温5—35℃，保持离心腔及腔盖封闭垫清洁，转头及配件用后要清洗干净，空气晾干。

　　Eppendorf 5810R低温高速离心机操作流程及注意事项

　　位置：科研楼二层开放实验区

　　离心机是利用离心力对混合液(含有固形物)进行分离和沉淀的一种专用仪器，即利用离心机转子高速旋转产生的强大的离心力，加快液体中颗粒的沉降速度，把样品中不同沉降系数和浮力密度的物质分离开。

　　操作流程

　　一、开机 ：按“power”键打开离心机电源开关，此时机器启动，有压速机启动声音。

　　二、放置物体：

　　1.平衡物品：将需要离心的液体导入专用离心管内，要求液体的装量不要超过总体积的4/5，然后在相应的天平进行平衡。

　　2.平衡放置离心管，离心管要对称放置，如管为单数不对称时，应再加一空管放入相同质量的水，调整使其质量对称，盖紧离心机上盖。

　　三、设置离心参数：

　　1.调节温度按钮，设定所需离心温度;

　　2.调节速度设置按钮，设定所需离心速度，但最高不得超过4000rpm;

　　3.按分/秒选择按钮，确定使用“分”或“秒”计时，再调节时间设置按钮，设置离心时间;

　　四、开始工作：

　　1.检查离心机盖是否盖紧 ，按“start”键，离心机工作;

　　2.如发现有不平衡或其他异常情况，按“stop”键立即停止离心;

　　3.在预设时间完成以后，“STOP”键指示灯闪烁，机器停止工作。

　　4.等待机器完全停止下来，“STOP”灯熄灭，转速为零，打开机器上盖，取出离心物品，此时离心工作完成。

　　五、测定工作全部结束后应做的工作：

　　1.每次使用完毕，立即清洁并悬挂标识，填写仪器使用记录。

　　2.用细软布擦拭箱体表面污迹、污垢目测无清洁剂残留，用清洁布擦干。

　　注意事项

　　1.注意放置样品时的物品平衡;

　　2.离心时注意将离心机盖子盖紧，以防高速离心时样品飞出;

　　3.离心工作完成。取出离心管时应小心，勿使已经沉淀的物质不因震动而上升，发生混浊。

　　细胞涂片离心机操作规程

　　位置：科研楼一层东侧开放仪器区

　　1. 开电源，取出转头，对称放入玻片夹

　　2. 加入样品(50---100ul细胞悬液)，盖内盖，转头放回，固定、盖机盖

　　3. 调好转速、时间、按STAT

　　4. 停机后，取出转头、样品，将转头放回，关机

　　5. 用蒸馏水冲洗加样漏斗，放置凉干

　　6. 填写记录

　　万分之一天平 AEU—210

　　位置：科研楼二、五层开放实验区

　　性 能 ：灵敏度高，最大称量为200g，精确至1mg

　　操作规程 ：

　　1.按TARE调零后将称量纸放在托盘上，待左边箭头出现后按TARE调零(除纸重)

　　2.用药勺将样品轻放在称量纸上，待左边的箭头出现，所显示的数字为称量量。

　　3.称毕拿下称量纸，按TAER调零填写实验记录

　　注意事项 ：1.不要超过最大称量

　　2.在托盘上只能放硫酸纸或锡纸

　　3.不可在托盘上加减样品

　　AL—500天平

　　位置：科研楼二、五层开放实验区

　　基本性能 ：最大称量为 500g,精确至0.1g

　　操作规程 ：1.按TAER调零后将称量纸或称量器皿放在托盘上，在按TAER调零后将样品放置器皿中称量

　　2.称毕，将称量纸或称量器皿拿走，按TAER回零，擦净托盘

　　冷冻抽干机操作规程

　　位置：科研楼地下室离心机室

　　1. 开机前检查电源，干燥机是否干净，真空泵是否有油。

　　2. 接通电源(LV应为220V)，室温(AT)20摄氏度

　　3. 开Refrigerate,C1显示制冷温度，RT为开机时间

　　4. 待OK灯亮，开Vacuum，V1显示真空度

　　5. 待OK灯亮，接预冷至<-40℃样品，接通真空系统

　　6. 解除真空，关Vacuum，关机，切断电源

　　7. 将抽气筒移开化箱。填写记录

　　注意：关机前必须解除真空

　　紫外分光光度计 UV2100

　　位置：科研楼一层东侧开放仪器区

　　技术指标 ：单波长，双光路

　　波长范围 190—900nm

　　谱带宽度 0.1，0.2，0.3，0.5，0.8，1，2，5，02，05nm

　　测光量程 吸光度−4~5Abs，透光率/反射率0~999.9%T

　　操作规程 ：

　　1. 主机开关，监视器开关，光度计开始自检。

　　2. 自检结束，荧光屏幕显示

　　(1)SPECTRUM (波长扫描)

　　(2)TIME SCAN (时间扫描)

　　(3)QUANTITATIVE(定量分析)

　　按需要选择测定方式。

　　3. 用NEXT进入下一步(必要时)

　　4. 用GO TO λ 改变波长。

　　5. 用AUTO ZERO调零。

　　6. 测定结束，按ESC键返回初始状态，先 关监视器，后关主机。

　　7. 填写实验记录。

　　细胞超声粉碎机操作规程

　　位置：科研楼一层东侧开放仪器区

　　1、 接通电源

　　2、 将枪头插入细胞液，调旋钮到所需强度，计算时间

　　3、 时间到，将旋钮旋回，枪头取出

　　4、 关电源，用蒸馏水冲洗枪头，擦干放回原处

　　5、 填写记录

　　注 意 ：1.不得按 AUTO PRINT键

　　2.称量纸一定要用硫酸纸或锡纸

　　PCR仪使用规则

　　位置：科研楼二、五层开放实验区

　　1. 开机自检。

　　2. 按Enter进入选择编辑状态or List.

　　3. 根据所需的条件输入。

　　4. PCR结束后按STOP将仪器回到初始状态，再关机。

　　5. 本机需预约登记!初次使用请本室工作人员协助。

　　PE2400PCR仪使用规则

　　位置：科研楼二、五层开放实验区

　　1. 开机自检。

　　2. 按“F2”键进入编辑状态，根据所需条件输入。

　　3. PCR结束后按STOP键，按“Exit”键返回初始状态，再关机。

　　注：本机需预约登记!初次使用请本室工作人员协助。

　　AB 2720PCR仪操作流程及注意事项

　　位置：科研楼五层分子诊断

　　PCR仪模拟DNA的天然复制过程合成特异的DNA片段，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。本实验室使用的是ABI PCR仪。

　　操作流程

　　1. 开机 ：先打开位于仪器后方右侧的电源开关，开启仪器。视窗上显示“SELF TEST”,显示10秒中后，显示RUN-ENTER菜单，准备执行程序。

　　2. 放标本：放入样本管，关紧盖子。

　　3. 编辑程序：输入新的程序，按《creat》F2键，显示标准程序，按箭头方向键改变需要的温度和时间，输入结束后可按《start》F1键直接运行程序，屏幕显示《反应体系》，以数字键输入反应体系，按《start》F1键则开始执行程序。

　　4. 开始工作：

　　用《info》键可以显示当前运行状态，可以显示大约的实验结束时间，用《stop》或《Cancel》可停止运行的程序。

　　5. 实验结束：试验结束后，关闭电源，将样品管拿出。

　　6. 测定工作全部结束后应做的工作：清洁仪器表面，并进行所需之保养。

　　7. 附其它PCR仪操作：

　　7.1如果要运行已经编好的程序，则直接按《RUN》F1键，用箭头键选择已储存的程序，按《start》F1键，则屏幕显示《反应体系》，以数字键输入反应体系，按《start》F1键则开始执行程序。

　　7.2如果要输入新的程序，按《creat》F2键，显示标准程序，按箭头方向键改变需要的温度和时间，输入结束后可按《start》F1键直接运行程序，也可按《STORE》F2键保存程序，按《method》键，命名新的程序，最多8个字母，最后按《accept》键保存程序。

　　7.3编辑程序

　　7.3.1按《edit》F3键，用方向键选择需要编辑的文件名，或选择《user》键命名新的程序，最多8个字母，输入后按《enter》确认，然后按《edit》F1键开始编辑程序。

　　7.3.2输入程序步骤：用方向键移动光标，根据需要用键盘数字键输入温度、时间和循环次数。

　　7.3.3输入结束后可按《start》F1键直接运行程序，也可按《STORE》F2键保存程序，按《method》键，命名新的程序，最多8个字母，最后按《accept》键保存程序。

　　7.4其它：用《pause》可以暂停一个运行的程序，再按一次继续程序。

　　用《stop》或《Cancel》可停止运行的程序。

　　用《info》键可以显示当前运行状态。

　　7.5其它操作：

　　7.5.1可以用《Cancel》键删除输错的值，输入新的值后按《ENTER》确认。

　　7.5.2删除已经储存的程序：按《Util》键，可显示“utilities”屏，按《More》键，可显示“delete”，按《delete》F1键，可出现method菜单，在菜单中选择要删除的method，按F1键，再按《Yes》F1键确定删除。

　　7.5.3查看程序的步骤：在主菜单上选择《RUN》键，用方向键选择感兴趣的程序名称，按《VIEW》键，即可显示感兴趣的程序内容，此时不能改变程序的值。

　　注意事项

　　1. 防止PCR过程中的污染;

　　2. 设立对照：设立阳性对照、阴性对照和试剂对照;

　　3. 操作时注意电源不要意外关闭;

　　4. 注意避免PCR仪样品池的污染。

　　琼脂糖凝胶电泳设备操作流程及注意事项

　　位置：科研楼二、五层开放实验区

　　琼脂糖凝胶电泳是用琼脂糖凝胶作支持物的电泳法，借助琼脂糖凝胶的分子筛作用，核酸片段因其分子量或分子形状不同，电泳移动速度有差异而分离。是基因操作中常用的重要方法。本实验室所用的仪器是Bio-Rad Power PacTM Basic电泳仪。

　　操作流程

　　1、凝胶准备：将称好的琼脂糖置三角瓶中，加入电泳缓冲液，微波炉加热熔化琼脂糖，熔化的琼脂糖自然冷却到60～70℃时，加入EB并轻轻混匀。

　　2、胶床准备：取出胶床和梳子，将梳子垂直插入到胶床的小凹槽内，梳齿底端和床面有1mm的间隙，将胶床放在调整好的水平台上。

　　3、铺胶：将冷却致60℃的凝胶倒入准备好的胶床内，凝胶厚度3～5mm，室温下静置30分钟左右，凝胶固化。将凝胶的胶床置于电泳槽中，并使样品孔位于电场负极。

　　4、电泳准备：向电泳槽中加入电泳缓冲液，越过凝胶表面即可，轻轻拔出固定在凝胶中的梳子。

　　5、样品准备：向核酸样品中加入上样缓冲液，用加样器轻轻混匀

　　6、上样：用加样器吸取样品，轻轻的加入到凝胶的样品孔中。

　　7、电泳：盖上电泳槽，打开位于仪器右侧的电源开关，设置电泳参数按《V》键后可以“↑”键或“↓”键调节电压值，按《A》键后可以“↑”键或“↓”键调节电流值。在待机/预置状态下按“RUN/STOP”键，进入运行状态，电泳仪输出高压。

　　8、电泳结束后，按“RUN/STOP”键，返回待机/预置状态，取出凝胶。

　　9、电泳结果分析：在紫外检测仪直接观察电源条带并摄影记录

　　10、测定工作全部结束后，检查电极是否干燥;用软布清洁仪器表面。

　　注意事项

　　1、凝胶浓度选择根据样品DNA分子大小而定，所以电泳前应对DNA片段大小有粗略的估计;

　　2、用胶布封闭胶床两端时，要确保严密，以免灌胶时有胶液漏出;

　　3、用微波炉熔化琼脂糖时，以免突然产生气泡，使琼脂糖溢出来;

　　4、凝胶冷却至60℃左右，立即铺胶，以防凝固;

　　5、上样前检查样品孔内是否有气泡，并设法排除;

　　6、电泳前，确认样品孔位于电场负极;

　　7、因EB存在，全部操作过程要带防护手套，排放要按规定执行。

　　电泳仪使用规程

　　位置：科研楼二、五层开放实验区

　　电泳仪(使用的输出电压范围： 100V，300V，600V)防止触电要要点：

　　1. 使用前检查电源、电压电流旋钮是否在零点，将红、黑色插头分别插入同色插口。

　　2. 打开开关，调节所需电压电流，不得超负荷运行。

　　3. 电泳结束将电钮调回零点，再关开关。

　　4. 先从电泳仪接口处拔下红黑插头，再拔 掉电泳槽连线。

　　5. 电泳仪接线请勿接触有水的地方，以防短路，仪器受损。

　　具体操作步骤：

　　1实验前的准备工作：

　　a)检测电泳液的配方的离子浓度是否正确;

　　b)电线连接是否可靠;

　　c)调节电源输出值;

　　d)打开电源开关，进行预电泳，观察槽中导线是否有连续的小气泡，若过多则减小输出，反之加大输出。

　　2实验操作：

　　a)将预制作好的凝胶放入电泳槽，注意正负极性;

　　b)加样动作快而准、轻，防止样品在凝胶中扩散;

　　c)在跑大胶板是要注意均匀降温，否则玻璃板会爆裂，电泳条带会走形。

　　d)在电泳过程中可用手提式紫外灯照射观察条带，也可在关闭电源的情况下，将凝胶取出，放到专业凝胶图像处理仪上观察。

　　e)结果处理：一般可以通过拍照，保留图像，以便后续处理。

　　3注意事项：因为实验中使用的EB是一种强致癌物资，实验中要做好防护，实验操作要区分清洁区和污染区，废物要区分放置，以便分级处理。对凝胶的处理有晒干后焚烧处理和深埋处理。严禁：直接倒入垃圾箱，当普通垃圾处理。

　　凝胶成像仪操作流程及注意事项

　　位置：科研楼二、五层开放实验区

　　凝胶成像仪是对DNA/RNA/蛋白质等凝胶电泳不同染色(如EB、考马斯亮蓝、银染、Sybr Green)及微孔板、平皿等非化学发光成像检测分析。凝胶成像系统可以应用于分子量计算,密度扫描,密度定量, PCR定量等生物工程常规研究。本实验室所使用的是SynGene G;BOX凝胶成像仪。

　　操作流程

　　1 接通外接电源，按下灯箱后面的开关，打开电脑。

　　2 小心将凝胶放入凝胶成像仪的样品仓，并将凝胶位置放正。

　　3 打开电脑上的“GeneSnap from SynGene”图标，“view live image and adjust camera setup”按钮为绿色，调节exposure time(曝光时间)，通过软件上的open iris(焦距)、zoom in on the sample(光圈)和adjust fine focus near(远近按钮)调节到最清晰的图片，然后关紧仓门，然后点击照相按钮。

　　4点击软件界面上的“File”选项，选择“save image”项，保存所拍图片。

　　5 关闭软件界面。

　　6 关闭灯箱后面的电源开关，关闭电脑和外接电源。

　　7 如实登记凝胶成像系统的使用情况。

　　注意事项

　　1 注意DNA凝胶含有EB，操作时应戴手套。并防止EB污染。

　　2 使用完后请在记录本上登记。

　　3 凝胶成像系统电脑为图像扫描分析专用，不得作其它用途，不得修改电脑设置。

　　4 如出现故障，应及时向中心工作人员汇报解决。

　　常规仪器设备的使用、操作和维护程序

　　位置：科研楼二、五层开放实验区

　　1.目的：正确操作使用仪器设备，确保检测质量，保障仪器设备的使用寿命，充分发挥仪器效益和效率。

　　2.范围：电热恒温水浴锅、超净工作台、冰箱、电泳仪等。

　　3.使用程序

　　3.1.仪器设备的使用授权：

　　a)仅有本实验室工作人员有权使用实验室的仪器设备。

　　b)仪器设备的使用者在使用前首先必须熟悉仪器设备的操作使用程序并经室主任考核认可。

　　3.2.仪器的使用：

　　a)仪器设备的使用严格遵守分区使用管理。

　　b)仪器设备的使用必须严格遵循仪器设备的标准操作规程。

　　c)主要仪器使用时每次工作应有相应的使用记录。

　　4.操作及维护程序

　　4.1.电热恒温水浴箱

　　4.1.1水浴箱应置于坚固的水平台上，电源电压须匹配。

　　4.1.2在水浴箱内注入一定量的蒸馏水。

　　4.1.3打开电源开关，把温度控制器的温度调节旋钮至设定温度。

　　4.1.4在每次水浴箱使用前，放入标准温度计同时监测实际水温，以校正温度。

　　4.1.5水浴箱工作温度波动范围应控制在：设定温度 +/–1℃以内。

　　4.1.6水浴箱要有水浴箱温度记录表，记录每天温度;如温度超出正常范围，该温度应划上红圈，并把修正操作记录下来。

　　4.1.7水浴箱内外应保持清洁，外壳忌用腐蚀性溶液擦拭。

　　4.1.8仪器不用时，需套好防尘罩，以免温度控制器受潮影响使用。

　　4.2 .超净工作台

　　4.2.1 新安装或长期未使用的工作台，使用前必须用超净真空吸尘器或不产生纤维的物品认真进行清洁工作。

　　4.2.2 接通电源，使用前应提前15～30分钟同时开启紫外灯和风机组工作。

　　4.2.3风机、照明均由批示灯指示其工作状态，工作时，发光。

　　4.2.4 工作台面上禁止存放不必要的物品，以保持工作区的洁净气流不受干扰。

　　4.2.5 禁止在工作台面上记录书写，工作时应尽量避免作明显扰动气流的动作;禁止在预过滤进风口部位放置物品，以免挡住进风口造成进风量减少，降低净化能力。

　　4.2.6 使用结束后，用消毒液清理工作台面后打开紫外灯，15～30分钟后关闭紫外灯，关闭洁净台电源。

　　4.2.7 每次使用洁净台后，均需对洁净台进行清洁。

　　4.2.8 做好维护记录。

　　4.2.9长期不使用的工作台拨下电源插头。

　　4.3 .普通冰箱

　　4.3.1 开、关机：试剂冰箱按说明书要求放好后，插上电源线，冷藏室温度开关置于4℃，冷冻室温度开关置于 -20℃，2小时后用温度计确认。系统进入正常运行状态后即可正常使用。

　　4.3.2 若冰箱较长时间不用或需要送修时需按以下步骤操作：

　　a)关闭冰箱电源，并拔下电源插头。

　　b)清空冰箱内的所有贮存物，并妥善放置到其它冰箱内。打开冰箱门，等待冰箱内的霜化完。

　　c)用肥皂水擦洗干净冰箱内胆，后用消毒液擦洗一次。

　　d)保持冰箱门打开待其自然干燥。

　　4.3.3 冰箱应放置于水平地面并留有一定的散热空间。

　　4.3.4 外接电源电压必须匹配，并要求有良好的接地线。

　　4.3.5 放入冰箱内的所有试剂、样品、质控品等必须密封保存。

　　4.3.6 保持冰箱出水口通畅;非自动除霜冰箱应定期除霜;定期清洁冰箱，清洁时切断电源，用软布蘸水擦拭冰箱内外，必要时可用中性洗涤剂。

　　4.3.7 每日由专人负责观察冰箱内温度并记录于表中，记录表贴于门上，每月一张，一年装订成册存档。

　　4.3.8 若温度超出规定范围，调节温控使其回到正常范围，并进行记录。

　　4.3.9 若温控调节无效，报请设备科维修，修理后须验收合格并签字后方能正常使用。

　　高温烤箱使用规则

　　位置：科研楼二、五层开放实验区

　　一.易燃及塑料制品不准放入此烤箱!

　　二. 使用方法：打开电源即可。温度已经设置好，请勿动其它开关!

　　三. 到时请断电，不准过夜使用!以确保安全。

　　四.待烤箱降置室温后再开门取物。

　　五. 请登记科室、姓名、电话、开始及结束时间。

　　中低温烤箱使用操作规程

　　位置：科研楼二、五层开放实验区

　　1. 使用烤箱前检查烤箱内有无待烤或已经烤好的用品，并妥善处理。

　　2. 插上电源，打开开关，然后调整所需温度。

　　3. 试管和培养瓶应用锡纸封口，切勿用纸包裹，塑料用品不得用高温烤。用于烤干目的而非灭活RNA酶的操作应不超过80℃.

　　4. 烤箱用毕，按“断”键后，再关开关。

　　5. 拔掉插销。

　　6. 待温度降至室温再开烤箱门。

　　7. 填写使用记录。

　　高压锅使用注意事项

　　位置：科研楼二、五层开放实验区

　　1. 首次使用应请工作人员示范。

　　2. 检查高压锅内的水的位置：加入蒸馏水，水位应在电圈2cm(厘米)以上。

　　3. 将内锅放好，将排气管插入。

　　4. 将盖盖好，螺旋对称拧紧。

　　5. 插上电源5分钟后放下减压阀。

　　6. 待压力上升至0.15Mpa后开始排气，并记录时间，一般15分钟至20分钟即可达到消毒目的。

　　7. 拔掉电源，待高压锅压力表降至“0”前，不可开取，以防烫伤。

　　8. 使用高压锅时，使用者不得远离!

　　洁净台使用注意事项

　　1. 消毒洁净台(打开紫外灯照射30’—40’)并记录起、止时间于登记本上。

　　2. 洁净台内切勿放有机溶剂

　　3. 如试剂滴洒于洁净台上，请及时清洁。

　　4. 实验结束请用70%乙醇清洁台面。

　　测量仪器设备统一管理标准程序

　　1.目的：确保设备仪器的精确性，保证实验的准确性。

　　2.适用范围：实验室所有测量设备(包括移液器、温度计、湿度计等)。

　　3.操作人：中心实验室指定带教老师

　　4.操作方法

　　a)根据具体仪器的要求在规定时间内上报设备科，要求仪器校准。如移液器校准时间半年;温度计、湿度计1年。

　　b)由医院设备科统一校准。

　　c)详细记录校准仪器的名称型号、以及校准时间。

　　d)一些测量设备(如温湿度计)可只校准一套，校准过的测量设备可作为实验室其它该种测量设备的参照。

　　e)一些仪器设备(包括冰箱、水浴箱等)每天都要用校准过的温度计进行测定、记录，以确保其精确性，保证实验质量。

　　连续可调式移液器的操作及校准程序(个人装备)

　　1.目的：正确使用移液器，确保移液器加样的精确性和准确性。

　　2.适用范围：各种品牌、型号的连续可调式移液器。

　　3.操作程序

　　3.1 转动旋钮设定移液量，设定的移液量不可超出该移液器规定的范围。

　　3.2 装上配套的吸头(Tip)。

　　3.3 将按钮压至第一停点位置。

　　3.4 将移液管吸头浸入液面下2～3mm深处，然后慢慢松开按钮吸入液体。待移入吸头吸满液体后，将吸头撤出液面，擦掉吸头外侧的所有液滴。

　　3.5 轻轻压下操作按钮至第一停点位置，放出液体。约1秒钟后，继续将操作按钮向下压至第二停点位置。待吸头液体放干净后，将吸头贴在容器瓶壁上防止形成液滴滴入瓶中，撤出吸头。

　　3.6 松开按钮使之回到起点位置。需要时，可更换吸头继续移液操作。

　　4.校准方法

　　4.1 .校准环境和用具要求

　　室 温：20～25℃，测定中波动范围不大于±0.5℃。

　　电子天平：放置于无尘和震动影响的台面上，房间尽可能有空调。称量时，为保证天平内的湿度(相对湿度60～90%)，天平内应放置一装有10mL蒸馏水的小烧杯。

　　小烧杯：5～10mL体积。

　　测定液体：温度为20～25℃的去气双蒸水。

　　选定校准体积：

　　a)拟校准体积;

　　b)移液器标定体积的中间体积。

　　c)最小可调体积(不小于拟定体积的10%)。

　　如为固定体积移液器，则只有一种校准体积。

　　4.2 .校准步骤

　　a)将移液器调至拟校准体积，选择合适的吸头;

　　b)调节好天平;

　　c)来回吸吹蒸馏水3次，以使吸头湿润，用纱布拭干吸头;

　　d)垂直握住移液器，将吸头浸入液面2～3mm处，缓慢(1～3秒)一致地吸取蒸馏水;

　　e)将吸头离开液面，靠在管壁，去掉吸头外部的液体;

　　f)将移液器以30℃角放入称量烧杯中，缓慢一致地将移液器压至第一档，等待1～3秒，再压至第二档，使吸头里的液体完全排出;

　　g)记录称量值;

　　h)擦干吸头外面;

　　i)按上步骤称量10次;

　　j)取10次测量值的均值作为最后移液器吸取的蒸馏水重量，按附表1所列蒸馏水Z因子计算体积;

　　k)按校准结果调节移液器。